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- Cód. Trabalho: 5011 | Palavras-chave: Carne cultivada, biPSCs, Células adipogênicas, Células Satélites
- Título: Geração de células musculares in vitro a partir de células-tronco pluripotentes induzidas na espécie bovina
- Autor(es): Tiago William Buranello, Fabiana Fernandes Bressan
- Resumo:
Carne cultivada é uma alternativa para mitigar impactos causados pela pecuária tradicional. A utilização de células-tronco de pluripotência induzida bovinas (biPSCs) é uma abordagem revolucionária e inédita para produção de carne cultivada, possibilitando a diferenciação e produção em larga escala de células musculares e de gordura. O objetivo do estudo foi diferenciar biPSCs em células adipogênicas e miogênicas, e avaliar via coloração ou RT-qPCR. Para a diferenciação adipogênica as biPSCs foram mantidas por 21 dias em meio comercial StemPro, fixadas e posteriormente coradas com Oil Red para deteção de acúmulo lipídico. Na diferenciação miogênica 5 estratégias diferentes foram utilizadas. Resumidamente, biPSCs foram mantidas por 45 dias com trocas de meios em D0, D3, D6, D8 e D24, sendo os meios DI-CL, DI-CLF, DK-HIFL, DK-I e SKGM respectivamente. A partir do D24 ao D45 foram mantidas em meio SKGM suplementado com 1% N2, ou com 2% Horse Serum (HS), resultando em 10 amostras para serem avaliadas. Análise via RT-qPCR foi realizada nas 10 amostras D45 mantidas em meio N2 e HS e foram avaliadas para marcadores endodérmicos, ectodérmicos e mesodérmicos, além de marcadores miogênicos específicos como PAX7, MYOD, MYOG. A expressão significativa de TUBB3 nas 10 amostras indica a diferenciação na camada ectoderma. Genes específicos de miogênese PAX7 e MYOD não foram detectados. No entanto, uma amostra D45 mantida em SKGM + HS teve expressão de MYOG próxima à encontrada no músculo controle. Portanto, a diferenciação preliminar de biPSC em células adipogênicas e células miogênicas foi realizada. Na diferenciação miogênica será necessário o ajuste nas etapas inicias, a fim melhorar a eficiência da diferenciação no destino mesodérmico e consequentemente obter uma cultura homogênea de células musculares.